Caracterización genotípica y fenotípica de aislamientos clínicos de Vibrio cholerae provenientes de Sudáfrica

Número: 
Autores/Authors: 
Edith Suzarte Portal, Talena Ledón Pérez, Javier Campos Gómez, Karen Marrero Domínguez, Barbara Cedré Marrero*, Boris L. Rodríguez González, Arlenis Moreno Guerra, Chetna Govind,** Rafael Fando Calzada.*
Palabras Claves / Key words: 
Vibrio cholerae, CTXφ, aislamientos clínicos africanos, CTXφ array, South African clinical strains.
Resumen: 
Numerosas epidemias de cólera causadas por cepas de Vibrio cholerae toxigénico del serogrupo O1 azotan a muchos países de Africa Subsahariana, sin embargo, existe poco conocimiento de las características de estas cepas epidémicas. El presente trabajo caracteriza un grupo de cepas de V. cholerae biotipo El Tor aisladas en pacientes de cólera en Sudáfrica durante 2003. Se estudió la producción de toxina colérica, la organización del profago CTXφ en el genoma, el perfil proteico por SDS-PAGE, el polimorfismo de los fragmentos de restricción del gen que codifica para el ARN ribosomal 16S y la resistencia a tetraciclina. La cantidad de toxina producida en medio AKI por estos aislamientos, se determinó mediante un ensayo de GM1-ELISA y osciló entre 200 y 2 200 ng/mL, lo cual concuerda con las cantidades informadas para otras cepas El Tor cultivadas en las mismas condiciones. Todas las cepas analizadas mostraron resistencia a tetraciclina como consecuencia de la presencia del gen tetA en su genoma. Al analizar la organización del profago CTXφ en el genoma de estas cepas, se pudo demostrar la existencia de una estructura particular de CTXφ caracterizada por una o múltiples copias en tándem del profago integrado en el cromosoma II de V. cholerae y un RS1 independiente en el sitio dif del cromosoma I o mayor. Esta estructura difiere de la descrita para la mayoría de las cepas de V. cholerae El Tor. El perfil proteico en SDS-PAGE y el análisis de ribotipos en estas cepas mostró que todas conformaban un grupo fenotípicamente homogéneo con un posible origen clonal.
Abstract: 
Cholera outbreaks caused by toxigenic Vibrio cholerae serogrup O1 frequently occur in many Sub-Saharian African countries. In this work it was characterized some features of V. cholerae O1 El Tor strains isolated in South Africa from cholera patients, which included the genetic organization of the CTXφ prophage, the protein profile, ribotyping, the production of cholera toxin and the resistance to tetracycline. Analysis of the organization of the CTXφ region on the genome of these strains revealed that they carried one or more copies of the CTXφ element integrated in tandem in the small chromosome of V. cholerae and an RS1 element independent in the large chromosome, in sharp contrast with the majority of El Tor strains where one or more copies of the CTXφ element are integrated in the large chromosome of V. cholerae. The amount of cholera toxin produced by these strains in AKI medium was determined by GMI ELISA and ranged from 200-2 200 ng/mL, which is similar to the quantity produced by other El Tor strains under the same conditions. The protein profile and ribotyping of South African V. cholerae strains showed a unique phenotypical homogeneous group that indicates a single clonal origin. They also showed resistance to tetracycline due to the presence of the gene tetA on their genome.
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