Comparación de métodos en el diagnóstico de la infección por HeLicobacter pyLori en pacientes con desórdenes gastroduodenales

Número: 
Autores/Authors: 
Yampier Roblejo Suárez, Marcia Samada, Juan González Cansino, Carlos Alfonso Sabatier, Margot Martínez Arroyo, Arlenis Marrero, Rafael Fando, Boris Luís Rodríguez González
Palabras Claves / Key words: 
Helicobacter pylori, PCR, métodos de diagnóstico, diagnostic methods
Resumen: 
En este trabajo se emplearon tres métodos directos (histología, cultivo microbiológico y PCR) y uno indirecto (serología) para la detección de Helicobacter pylori en pacientes con diferentes patologías gastrointestinales. En la detección histológica se empleó la coloración de hematoxilina-eosina y para el cultivo un medio de crecimiento específico. En la PCR se evaluaron dos juegos de cebadores espec íficos, uno que amplifica en el gen que codifica para la enzima fosfoglucosamina mutasa (glmM) y el otro en el 16S ADNr. Asimismo, la detección serológica se realizó empleando un juego de diagnóstico comercial. Se estudiaron 141 pacientes. Se observ ó la presencia del microorganismo en el 57,6 y 64,4 % de los individuos, por cultivo e histología, respectivamente. Con la PCR y el juego de cebadores para el gen glmM se detectó el mayor número de casos positivos, 116 (82,3 %), seguido por los cebadores para el gen 16S ADNr, 93 (66 %). También se detectaron anticuerpos espec íficos contra H. pylori en el 61,1 % de los pacientes. La concordancia entre todas las técnicas de diagnóstico directo fue de 66,1 %. Además, en pacientes con úlcera, tanto por cultivo-histología como por la PCR (con cebadores para glmM) la detección sobrepas ó el 80 %, siendo de hasta un 94 % en la úlcera duodenal. Se encontró una presencia significativamente mayor de H. pylori en pacientes con gastritis (p < 0,05) y úlcera duodenal (p < 0,01) al evaluarla por las técnicas de cultivo-histología. Tambi én se encontraron diferencias significativas en la detección del microorganismo en pacientes con gastritis y úlcera duodenal (p < 0,05) al realizar la técnica de PCR con los cebadores para glmM. Sin embargo, no existieron diferencias significativas en la infección por H. pylori de pacientes con mucosa gástrica sin alteraciones o con úlcera gástrica, al analizarla por cualquiera de los métodos de diagnóstico empleados. Se demostró que de las técnicas empleadas, la PCR es la mejor para la detección de H. pylori y que el juego de cebadores que amplifican en el gen glmM tiene la mayor sensibilidad. Además, se observó que entre los pacientes estudiados, la úlcera duodenal resultó la patología con mayor incidencia de casos positivos a H. pylori, seguida por la úlcera gástrica y la gastritis
Abstract: 
Here it was used three different direct methods (histology, culture and PCR) and one indirect (serology) to detect Helicobacter pylori infection in patients suffering several gastrointestinal diseases. The hematoxylin-eosin stain and a specific media were used to detect the microorganism by histology and culture, respectively. Two different sets of primers were used in the PCR methods, one of them amplified in the 16S DNAr coding gene and the other in the phosphoglucosamine mutase gene (glmM). On the other hand, a commercial diagnostic kit was used to detect serological antibodies. From the 141 patients studied, the microorganism was present in 57.6 and 64.4 % of them by culture and histology, respectively. The highest number of H. pylori positive patients were detected by the PCR using the glmM primer set, 116 (82.3 %), follow by the PCR with the 16S DNAr primer set, 93 (66 %). Additionally, specific H. pylori antibodies were detected in 61.1 % of the patients. A concordance of 66.1 % was obtained among all direct techniques used. Furthermore, in both, culture-histology and PCR using the glmM primers, the infected patients were higher than 80 %, rising up to 94 % in duodenal ulcer. It was found a significantly higher H. pylori prevalence in patients with gastritis (p < 0.05) and duodenal ulcer (p < 0.01) by culture-histology. In addition, statistical differences were also obtained in the infected subjects with gastritis and duodenal ulcer (p < 0.05) with PCR using the glmM primer set. However, there were not statistical differences in H. pylori infection among patients with normal gastric mucous or gastric ulcer, analyzed by all diagnostic methods used in this study. This paper demonstrated that PCR and the glmM primer set was the best combination to detect H. pylori infection with the highest sensitivity. The authors also observed a higher prevalence of H. pylori infection in subjects with duodenal ulcer, follow by gastric ulcer and gastritis
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