Diferencia en la viabilidad y estabilidad genética de mutantes de Escherichia coli crioconservados mediante un mismo método

Número: 
Autores/Authors: 
Angela Estela Sosa Espinosa, Yoanna Ariosa Morejón, Tanilo Rivero, Ivón Estévez .
Palabras Claves / Key words: 
crioconservación, mutantes de E. colμ, /criopreservation, E . colμ mutans .
Resumen: 
La Unión de Colecciones de Microorganismos de Rusia (VKM) utiliza una técnica simple para la congelación de células microbianas sobre gel de sílice, la cual aplica desde el a°o 1991 para preservar bacterias, hongos y levaduras de diversas especies . El objetivo de este trabajo fue determinar si este método es aplicable a diferentes mutantes de E . colμ que se utilizan comúnmente como hospederos en la expresión de proteínas recombinantes. Con este propósito, se estudió el comportamiento de dos indicadores: la viabilidad de los cultivos conservados y la estabilidad de los marcadores genéticos en 21 cepas de E. colμ K12, después de la liofilización sobre gel de sílice a los 30, 60 y 90 d de almacenamiento a -70 OEC . La estabilidad de las cepas en estudio fue diferente . Las cepas que contenían mutaciones recA o recBC fueron mñs susceptibles a los da°os que produce esta forma de conservación . Un estudio de la cepa HB101 transformada con diferentes plasmidios sugiere que la viabilidad, pero no la estabilidad genética depende de la información que portan los plasmidios . La forma de conservación dependió de la cepa, sobre todo, si estaban transformadas con plasmidios . En este caso, el método no es aplicable sin un estudio previo de estabilidad en tiempo real ; debido a que la susceptibilidad a la conservación varía en dependencia del plasmidio introducido, según evidenció el estudio en la cepa HB101 de uso común en los trabajos de donación de muchos laboratorios .
Abstract: 
The Microorganism Collection Union (VKM) from Russia uses a simple technique for the freezing of cells on silica gel . This method has been employed in VKM collection since 1991 for the conservation of bacteria, fungi and yeasts from different species . The aim of this work was to determine whether this method can be applied to different E. coli strains that are commonly used as hosts for plasmids or as expression strains in the molecular biology labs . For this purpose, the behaviour of indicators such as : the viability and the genetic stability of genetic markers from 21 E. coli strains after liofilization on silica gel at 30, 60 and 90 d of storage at -70 OEC was studied . The stability of the strain in study was different . The authors found that the strains containing the recA or recBC mutation are more sensitive to the damages that produce this type of conservation . A study of the HB101 strain transformed with different plasmids suggests that the viability but not the genetic stability depends on the genetic information contained on the plasmids . It was concluded that the election of the conservation form depends on the strain . In the case of recombinant strains the method is not applicable without a previous study of stability in real time . The stability varies depending on the plasmid introduced as the results of the study with the HB101 strain suggest . It's a strain of common use in the works of cloning in many laboratories .
pdf: