Particíon de la albúmina de suero bovino en sistemas acuosos bifases

Número: 
Autores/Authors: 
Luciano Sindra Virtuoso, Leonardo Ramos Paes Lima, Karla Andreíza Silva Figueiredo Vello, Heloisa Helena Costa Couto, Mariana Medeiros Alves, Jerusa Simone Garcia, José Maurício Schneedorf Ferreira da Silva
Palabras Claves / Key words: 
bovine serum albumin, biomolecules, aqueous two-phase system, partition coefficient, purification, albumina de suero bovino, biomoléculas; sistema acuoso bifases, coeficiente de reparto, purificación
Resumen: 

La albúmina de suero bovino (ASB) es una proteína importante, similar a la albúmina de suero humana, usado como un componente básico de los diversos reactivos biológicos para su uso diagnóstico, sobre todo para las pruebas de inmunohistoquímica, como los antisueros utilizados en las reacciones para la detección in vitro de antígenos de los glóbulos rojos o anticuerpos específicos. La extracción y purificación de la ASB, como la mayoría de las biomoléculas, es costosa y requiere el uso de las técnicas más sofisticadas en este contexto, los sistemas acuosos bifases (SAB), permiten la extracción y purificación de biomoléculas con costos relativamente menores, técnicas más sencillas, y permiten la expansión de la escala. En este trabajo, la partición de la ASB se ha estudiado en sistemas bifásicos acuosos, preparados mediante la mezcla de soluciones acuosas de polímero o copolímero en soluciones salinas acuosas (citrato de sodio y tartrato de sodio). El coeficiente de partición de ASB se investigó como una función del pH del sistema, el peso molecular del polímero, hidrofobicidad, línea de atraque del sistema y la naturaleza del electrolito. Los resultados mostraron una mayor influencia de la hidrofobicidad, la naturaleza del electrolito y el pH del sistema en el coeficiente de reparto de la ASB. Los coeficientes de partición relacionados con los principales factores mostraron valores que van desde 0,125 hasta 0,440, lo que indica el potencial del SAB como un método de extracción y purificación de la ASB. Las macromoléculas de ASB se concentraron en la fase de electrolitos ricos.

Abstract: 

Bovine serum albumin (BSA) is an important protein, similar to human serum albumin, used as a basic component of several biological reagents for diagnostic use, mainly for immunohematological tests, such as the antisera used in reactions for in vitro detection of erythrocyte antigens or of specific antibodies. The extraction and purification of BSA, as most biomolecules, has a high cost and requires the use of more complicated techniques, in this context there is the aqueous two-phase systems (ATPS), which allow an extraction and purification of biomolecules with relatively lower costs, simpler techniques, besides allowing an expansion on a large scale. Partition of the BSA has been studied in aqueous two-phase systems prepared by mixing aqueous solutions of polymer or copolymer with aqueous salt solutions (sodium citrate and sodium tartarate). The BSA partition coefficient was investigated as a function of system pH, polymer molar mass, hydrophobicity, system tie-line length and nature of the electrolyte. The results showed a higher influence of hydrophobicity, nature of electrolyte and pH of the system on the partition coefficient of BSA. The partition coefficients related to the most influential factors exhibited values ranging from 0.125 to 0.440, indicating the potential of the two-phase extraction with ATPS in the purification of BSA. The BSA macromolecules were concentrated in the eletrolyte-rich phase.

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