Estandarización de la Reacción en Cadena de la Polimerasa con Transcripción Reversa para el diagnóstico molecular de potyvirus que afectan a Capsicum annuum L. en Cuba

Resumen

Las enfermedades causadas por potyvirus no pueden ser controladas una vez que la planta es infectada al igual que ocurre con otras enfermedades virales. Por otro lado, la transmisión no persistente por áfidos representa un desafío para las estrategias de prevención y control de las enfermedades virales en cultivos de importancia económica. Sin embargo, un conjunto de medidas de manejo integrado de las enfermedades que afectan a los cultivos, pudieran evitar la introducción de virus a plantaciones sanas y jardines, o evitar su diseminación. No obstante y a pesar de todo el trabajo realizado, en los últimos años se ha comenzado a observar un fuerte incremento de los síntomas asociados a estos virus en los cultivos de pimiento (Capsicum annuum L.), lo que supone la incidencia de nuevos potyvirus circulantes o variantes recombinantes de los virus ya presentes, comportamiento que es muy frecuente en esta familia viral. Por lo que este trabajo tiene como objetivo estandarizar una técnica para el diagnóstico molecular de potyvirus mediante el empleo de la RT-PCR con cebadores genéricos. Se realizó un análisis in silico de la capacidad de los cebadores CP1 y CP2 para detectar la presencia de potyvirus y demostrar la amplificación de una región conservada que contiene el gen que codifica para la proteína de la cápsida viral. Posteriormente, se procedió a la estandarización del ensayo de RT-PCR en una sola etapa; los resultados demostraron que la técnica empleada es altamente sensible y específica para el diagnóstico genérico de potyvirus. Además, los resultados de este trabajo constituyen los primeros de este tipo para el país, ya que por primera vez se asiste al programa de mejoramiento genético del pimiento en Cuba con un método de diagnóstico molecular.